互补 DNA (cDNA) 是由信使 RNA 分子合成的 DNA 。cDNA 合成由一种称为逆转录酶的酶催化，该酶使用 RNA 作为 DNA 合成的模板 。逆转录酶最初是从逆转录病毒中发现和分离的 。这些病毒包含一个 RNA 基因组； 因此 ， 病毒需要产生其基因组的 cDNA 拷贝，以与宿主细胞的分子机制相容 。
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图1.cDNA的合成
有多种合成 cDNA 的 *** ； 我们简单介绍下传统 *** 合成 cDNA 。
- oligo(T) 片段用作引物以结合每个 RNA 的 3' poly(A) 尾巴 。
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- 逆转录酶以 RNA 为模板合成 cDNA 链 。
- 所得的 RNA-cDNA 杂交体用碱或 RNase 处理以水解 RNA 。
- 搁浅的 DNA 自身折叠起来并在 3' 端形成一个环 。由此产生的环的双链部分作为 DNA 聚合酶的引物，合成互补的 DNA 链 。
- 【cDNA的传统合成 ***cdna】S1 核酸酶将切断环，产生双链 DNA 。
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